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如何用ELISA試劑盒檢測(cè)硫磷殘留

更新時(shí)間:2013-09-26      瀏覽次數(shù):1249

通過制備對(duì)硫磷的特異性抗體,建立了蔬菜中對(duì)硫磷殘留的酶聯(lián)免疫吸附分析法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)。先將對(duì)硫磷苯環(huán)上的硝基還原為氨基,然后采用重氮化法將氨基-對(duì)硫磷與牛血清白蛋白(BSA)或卵清白蛋白(OVA)相偶聯(lián),分別合成了免疫原和包被抗原:氨基對(duì)硫磷-BSA、氨基對(duì)硫磷-OVA。對(duì)合成的抗原進(jìn)行紫外可見掃描,確證偶聯(lián)成功。用免疫原免疫新西蘭大耳白兔,制得對(duì)硫磷抗血清,測(cè)得其效價(jià)為1:2000,用飽和硫酸銨沉淀法得到純化抗體,與其它類似物的交叉反應(yīng)為甲基對(duì)硫磷:1.22%,毒死蜱:0.09%,殺螟松:0.06%,標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍為5-1000ng/mL。用此血清建立的ELISA方法檢測(cè)蔬菜樣品(小白菜、豆角、辣椒)中添加的對(duì)硫磷標(biāo)準(zhǔn)樣品,平均回收率為96.52%,與GC方法的相關(guān)性很高,準(zhǔn)確性大大高于酶抑制法,整個(gè)測(cè)定大約在(不包括包被時(shí)間)1.5h內(nèi)完成。

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